Protective mechanism of Wnt4 gene on Parkinson’s disease (PD) transgenic Drosophila

Objective: The main pathological change of Parkinson’s disease (PD) is progressive degeneration and necrosis of dopaminergic neurons in the midbrain, forming a Lewy body in many of the remaining neurons. Studies have found that in transgenic Drosophila, mutations in the PTEN-inducible kinase 1 (PINK1) gene may cause indirect flight muscle defects in Drosophila, and mitochondrial structural dysfunction as well.

Methods: In this study, Wnt4 gene overexpression and knockdown were performed in PINK1 mutant PD transgenic Drosophila, and the protective effect of Wnt4 gene on PD transgenic Drosophila and its possible mechanism were explored. The Wnt4 gene was screened in the previous experiment; And by using the PD transgenic Drosophila model of the MHC-Gal4/UAS system, the PINK1 gene could be specifically activated in the Drosophila muscle tissue.

Results: In PINK1 mutation transgenic fruit flies, the Wnt4 gene to study its implication on PD transgenic fruit flies’ wing normality and flight ability. We found that overexpression of Wnt4 gene significantly reduced abnormality rate of PD transgenic Drosophila and improved its flight ability, and then, increased ATP concentration, enhanced mitochondrial membrane potential and normalized mitochondrial morphology were found. All of these findings suggested Wnt4 gene may have a protective effect on PD transgenic fruit flies. Furthermore, in Wnt4 gene overexpression PD transgenic Drosophila, down-regulation autophagy and apoptosis-related proteins Ref(2)P, Pro-Caspase3, and up-regulation of Beclin1, Atg8a, Bcl2 protein were confirmed by Western Blotting.

Conclusion: The results imply that the restoring of mitochondrial function though Wnt4 gene overexpression in the PINK1 mutant transgenic Drosophila may be related to autophagy and/or apoptosis.     

胰腺胃肠间质瘤4例报告及文献分析

目的 讨论胰腺胃肠间质瘤的临床病理特征、预后影响因素及基因突变特征。方法 回顾性分析2010年5月至2018年10月西南医科大学附属医院确诊的4例胰腺胃肠间质瘤，并通过Pubmed及国内主要数据库检索国内外文献，进行文献复习及统计分析。结果 国内外报道病例共55例，合并本次报道共59例。男性30例，女性29例，最常见临床首发症状为腹部疼痛或不适有38例（64.4%）、腹部肿块10例（16.9%）、体检发现或其他症状11例（18.7%）；53例具有完整的影像学资料及组织学分型，影像学CT检查示肿瘤为不均匀低密度影，呈囊实性21例（39.7%）、呈实性20例（37.7%）、呈囊性12例（22.6%）；最常见组织学类型是梭形细胞为主型44例（83.0%）、混合型7例（13.2%）、上皮细胞为主型2例（3.8%）。5年总存活率及无疾病存活率分别为79.7%及39.3%；单因素及多因素分析均显示，核分裂象>5个/50HPF是影响病人术后复发转移的独立因素（P均<0.05）。10例基因突变病人中9例（90.0%）为c-kit基因突变，1例（10.0%）为PDGFRα基因突变。结论 胰腺胃肠间质瘤临床症状缺乏特异性，通常发现时肿瘤体积较大，多数病人具有高度风险性，且核分裂象>5个/50HPF是影响预后的独立因素,以c-kit基因突变多见。     

D-半乳糖联合对氯苯丙氨酸致肾不藏志不寐大鼠下丘脑神经递质和凋亡基因的实验研究

目的:观察D-半乳糖联合对氯苯丙氨酸(PCPA)致肾不藏志不寐大鼠下丘脑神经递质和凋亡基因的变化。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、老年组、失眠组、肾不藏志不寐组(模型组),每组10只。老年组大鼠给予D-半乳糖皮下注射,失眠组给予对PCPA腹腔注射,肾不藏志不寐组给予D-半乳糖皮下注射联合PCPA腹腔注射建立模型,对照组给予等剂量生理盐水注射。造模结束后测量各组大鼠体质量、采用水迷宫观察大鼠定位航行探索运动轨迹、采用RT-PCR法检测各组大鼠下丘脑GABAARα1、GABAARβ2、GABAARγ2、Bax、Bcl-2 mRNA的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组体质量显著降低(P<0.01);定位航行探索运动轨迹显著延长;模型组下丘脑GABAARα1、GABAARβ2、GABAARγ2、Bcl-2mRNA相对表达量均显著性降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.05);下丘脑Bax mRNA相对表达量显著性增加(P<0.05)。结论:D-半乳糖联合PCPA致肾不藏志不寐大鼠下丘脑睡眠相关的神经递质和凋亡基因表达发生改变。     

miRNA调控实体肿瘤发生发展机制研究进展

microRNA（miRNA）是广泛存在于动物、植物、微生物体内，在转录后水平调控mRNA翻译和降解的内源性染色体编码的小分子RNA。研究证实miRNA对实体肿瘤细胞的发生、增殖、分化、侵袭及转移均具有重要意义。目前miRNA与肿瘤相关性的研究主要集中在检测实体肿瘤组织或体液中miRNA的表达量，明确其对于肿瘤发生、发展的意义；寻找具有临床意义的miRNA靶点，并通过调控其表达抑制肿瘤增殖与转移。miRNA检测方法的进步，也为临床检测miRNA提供了可能。本文对miRNA在实体肿瘤发生发展的作用及其调控机制、以及未来研究方向作综述。     

基于生物信息学筛选胰腺导管腺癌关键基因

目的:利用生物信息学方法分析胰腺导管腺癌（PDAC）基因表达谱芯片并筛选关键基因。方法:从公共数据库基因表达数据库（GEO）中下载PDAC基因表达谱芯片GSE28735、GSE15471、GSE101448,共纳入108例PDAC样本和97例癌旁组织样本。应用R语言limma包和impute包筛选差异表达基因。利用DAVID数据库和在线分析工具Kobas分别对差异基因进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。利用STRING数据库和Cytoscape软件构建差异蛋白互作网络并进一步筛选关键基因。结果:3个基因表达谱芯片共有161个差异表达基因（|log2 fold-change(FC)|>2，P<0.05），包括54个上调基因，107个下调基因。GO功能富集分析显示差异基因与extracellular exosome、extracellular space、extracellular matrix organization密切相关。KEGG通路分析显示差异基因主要富集在protein digestion and absorption、ECM-receptor interaction和focal adhesion等通路。蛋白质相互作用网络图中显示节点最多的10个枢纽基因分别是ALB、COL11A1、COL3A1、FN1、EGF、COL1A1、MMP9、COL5A2、ITGA2、COL6A3。结论:筛选所得的10个关键基因可能在PDAC发生发展中发挥重要作用，有望成为PDAC诊断及治疗的生物学靶标，为进一步研究PDAC发生发展的分子机制提供了理论依据。     

下调REV7基因对于人结肠癌HCT116细胞放射敏感性影响及机制研究

目的 研究下调REV7基因表达对人结肠癌HCT116细胞放射敏感性影响及其机制。方法 对HCT116细胞进行培养并运用RNA干扰技术实现REV7基因下调,将细胞分为空白组、转染阴性RNA oligo片段阴性对照组、转染REV7 RNA oligo的REV7基因下调组。克隆形成实验反映细胞增殖水平,蛋白印迹法检测相关基因表达水平、细胞凋亡发生水平和非同源末端连接途径发生水平。结果 6Gy照后REV7 siRNA组细胞克隆形成率降低(P<0.05)。REV7 siRNA组REV7基因下调效率>60%。REV7 siRNA组γH2AX、Caspase9表达升高(P<0.05),Ku80、XRCC4表达降低(P<0.05)。结论 下调REV7基因能提高HCT116细胞放射敏感性,其机制可能与下调REV7后非同源末端连接的发生被削弱有关。     

沙参麦冬汤加减对阴虚肺热证肺炎支原体肺炎恢复期患者免疫炎症反应的影响

目的:观察沙参麦冬汤加减对肺炎支原体肺炎恢复期患者阴虚肺热证的疗效及对免疫炎症反应的调节作用。方法:将148例患者按随机数字表法分为对照组和观察组各74例。研究期间对照组脱落、失访2例,剔除3例完成70例;观察组脱落、失访4例,完成71例。两组患者均口服阿奇霉素片,10 mg·kg~(-1)·d~(-1),连服3 d;和匹多莫德颗粒剂,0.4～0.8 g/次,2次/d;和氨溴特罗口服溶液,2.5～15 mL/次,2次/d。对照组口服养阴清肺口服液,5～10 mL/次,2～3次/d;观察组内服沙参麦冬汤加减,1剂/d。两组疗程均为7 d。进行治疗前后咳嗽症状评分和咳嗽视觉模拟评分(VAS);记录咳嗽、肺部湿啰音,咯痰消失时间和胸片复常时间;进行治疗前后阴虚肺热证评分和莱塞斯特咳嗽问卷(LCQ)评分;检测治疗前后T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+和CD4+/CD8+)和白细胞介素-6(IL-6),IL~(-1)0,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),P物质(SP),降钙素原基因相关肽(CGRP)水平;进行治疗后安全性评价。结果:观察组疾病疗效总有效为95.77%(68/71),优于对照组的82.86%(58/70)(χ2=6.186,P0.05);观察组患者咳嗽症状积分和VAS评分均明显低于对照组(P0.01);观察组患者LCQ量表各维度评分和LCQ总分均高于对照组(P0.01);观察组患者咳嗽、肺部湿啰音、咯痰消失时间及胸片复常时间均短于对照组(P0.01);观察组CD3+,CD4+,CD4+/CD8+均高于对照组(P0.01),CD8+低于对照组(P0.01);观察组血清IL-6,IL~(-1)0,TNF-α水平和痰液中SP和CGRP水均低于对照组(P0.01)。结论:在西医常规治疗的基础上,采用沙参麦冬汤加减内服治疗MPP恢复期阴虚肺热证患者,可减轻咳嗽程度,缩短病程,改善了生活质量,提高了细胞免疫功能,减轻了炎性损伤,降低了咳嗽敏感性,有较好的临床疗效,且使用安全。